基于RAA荧光法快速检测呼吸道腺病毒的研究

作者：陈淑丹; 鲍哲英; ***; 吴亦斐; 李杰; 郑伟^*; 罗鹏; 吴忠华; 郭利川; 应清界

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2020, 43(04): 232-234.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2020.04.002

• 呼吸道腺病毒
• 重组酶介导核酸扩增技术
• 分子检测

目的利用重组酶介导核酸扩增技术(RAA)建立快速检测呼吸道腺病毒的方法。方法根据NCBI基因库中呼吸道腺病毒hexon基因保守序列设计引物及探针,建立RAA检测方法。构建携带腺病毒hexon基因片段的重组质粒,梯度稀释,评价RAA方法的灵敏性;用建立的RAA方法检测人偏肺病毒、人博卡病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒,验证方法的特异性。结果用不同拷贝数hexon基因片段的重组质粒进行RAA扩增,在20min内即可得到扩增结果,最低扩增拷贝数为10拷贝/μl;与人偏肺病毒、人博卡病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒无交叉反应。结论建立的RAA方法灵敏度和特异性高,反应快速、操作简单,适用于呼吸道腺病毒的快速检测。

• 单位
  杭州市疾病预防控制中心; 江苏奇天基因生物科技有限公司