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摘要
目的：优选土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮的纯化条件，建立其特征图谱，并评价其对重金属铅解毒作用，以期为土茯苓解铅毒作用方面的开发和应用提供数据基础及参考。方法：采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量，并以此作为评价指标，考察6种不同色谱填料对土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮纯化性能，筛选最佳纯化工艺；采用高效液相色谱法建立纯化后总黄酮的特征图谱；并以重金属铅致小鼠慢性毒性为动物模型，以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标，评价纯化后总黄酮解铅毒的活性。结果：土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮最佳纯化工艺为选用MCI填料，25%乙醇水溶液为上样溶剂冲洗3VB，60%乙醇水溶液为洗脱溶剂洗脱3VB，总黄酮含量78.0%。建立了总黄酮HPLC特征图谱，指认了5个特征共有峰。与模型组对比，总黄酮组小鼠采食量增加，血清中ALT、AST、Cr、BUN水平趋于正常，小鼠血液、肝脏和肾脏铅含量显著降低；病理切片结果显示，总黄酮对于铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用。结论：土茯苓总黄酮纯化工艺具有结果稳定、操作方便、含量较高特点。总黄酮特征图谱精密度、重复性和稳定性良好。纯化后的总黄酮对重金属铅具有显著解毒作用。研究结果可为土茯苓解铅毒的药效物质基础阐明提供参考，并为研发解铅毒新药提供理论基础。
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