腐皮镰孢菌壳聚糖酶的酶学性质研究及其在酿酒酵母工业菌株中的表达

作者：刘怀伟; 鲍晓明

来源：微生物学报, 2009, (12): 1607-1612.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2009.12.009

• 壳聚糖酶
• 壳寡糖
• 腐皮镰孢菌
• 酿酒酵母 Chitosanase
• chitooligosaccharide
• Fusarium solani
• Saccharomyces cerevisiae

【目的】本研究旨在了解腐皮镰孢菌(Fusariumsolani)壳聚糖酶的基本酶学性质及其在壳寡糖生产中的应用,构建能高效分泌表达壳聚糖酶的酿酒酵母工业菌株。【方法】采用RT-PCR扩增腐皮镰孢菌壳聚糖酶的cDNA序列;通过组氨酸标签,纯化得到E.coli表达的重组壳聚糖酶,并进行基本酶学性质研究;以薄层层析、高效液相色谱等技术对该酶的酶解产物进行分析;通过马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)菊粉酶信号肽(INU1A)实现壳聚糖酶在酿酒酵母工业菌株N-27中的分泌表达,得到高效分泌壳聚糖酶的重组工业菌株N-27C。【结果】所得到的壳聚糖酶cDNA序列(GenBan...

• 单位
  微生物技术国家重点实验室; 山东大学