天花粉蛋白结合肽的筛选及潜在靶点蛋白的同源分析

作者：赵峻; 时磊; 张芳^*

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2020, 36(01): 73-77.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2020.0073

• 噬菌体展示
• 天花粉蛋白
• 筛选
• 同源分析

目的通过噬菌体展示技术,筛选天花粉蛋白(TCS)的结合多肽,并通过蛋白质同源分析,研究TCS在体内可能直接作用的靶点蛋白。方法用构建的十五肽库和购买的十二肽库分别对TCS进行4轮固相亲和筛选,并通过噬菌体ELISA检验阳性克隆与靶蛋白的亲和力,对阳性克隆进行测序,并将多肽序列与已登记蛋白序列进行同源性分析。结果每轮筛选的回收率,及多克隆噬菌体ELISA结果显示筛选有效。通过单克隆噬菌体ELISA结果挑取阳性克隆,测序分析得到若干噬菌体展示多肽序列。经蛋白质同源性分析,TCS特异性结合多肽与蛋白激酶C(PKC)的磷酸化位点具有同源序列。结论噬菌体展示技术是筛选中药成分靶点蛋白的有效手段,PKC可能为TCS潜在的靶点蛋白。

• 单位
  南京中医药大学; 郑州大学第五附属医院