壮瑶药材马蹄蕨多糖的提取工艺及其3种单糖的含量测定方法研究

作者：张赟赟; 杨海船; 周萍; 何春欢; 严赟^*

来源：中国药房, 2018, 29(19): 2667-2670.

DOI：10.6039/j.issn.1001-0408.2018.19.17

• 马蹄蕨
• 壮瑶药材
• 多糖
• 提取分离
• 含量测定
• 高效液相色谱-蒸发光散射法

目的:对壮瑶药材马蹄蕨的多糖成分进行提取分离纯化,并建立同时测定其中鼠李糖、果糖和D-无水葡萄糖3种单糖含量的方法。方法:优化水提醇沉法提取马蹄蕨多糖,比较不同型号大孔树脂除蛋白效果,并考察DEAE-52纤维素柱纯化所用不同洗脱液。采用高效液相色谱-蒸发光散射法进行含量测定。色谱柱为ZORBAX NH2,流动相为乙腈-水(72∶28,V/V),流速为0.8mL/min,柱温为40℃,进样量为10μL。漂移管温度为50℃,载气流速为2.0 L/min,增益为1。结果:采用水提75%乙醇沉淀提取马蹄蕨粗多糖,D101大孔树脂除蛋白质,DEAE-52纤维素柱纯化,并依次用蒸馏水、0.2 mol/L NaCl、0.2 mol/L NaOH溶液进行洗脱,冷冻干燥,即得马蹄蕨多糖。鼠李糖、果糖和D-无水葡萄糖检测质量浓度线性范围分别为49.10982.02、54.471 089.42、62.151 242.96μg/mL(r≥0.999 6);检测限分别为7.4、3.2、4.4μg/m L,定量限分别为24.4、10.6、14.5μg/mL;精密度、稳定性(15 h)试验的RSD均<2%(n=6);重复性试验的RSD<3%(n=6);平均加样回收率分别为96.91%、97.43%、99.46%,RSD分别为1.3%、1.7%、2.2%(n=6)。结论:建立的多糖提取分离工艺简单,易操作;高效液相色谱-蒸发光散射法操作简单,结果准确度高,可用于马蹄蕨多糖的提取纯化及其中3种单糖的定量分析。

• 单位
  广西壮族自治区中医药研究院; 广西科技大学; 桂林医学院; 广西壮族自治区食品药品检验所