电针对功能性便秘小鼠肠道神经元自噬水平的影响

作者：席梦含; 王路; 张微; 郑倩华; 秦海燕; 鄢香芸; 陈思珏; 李瑛

来源：中国针灸, 2023, 43(11): 1279-1286.

DOI：10.13703/j.0255-2930.20230418-k0002

• 功能性便秘
• 电针
• 天枢
• 上巨虚
• 合募配穴
• 结肠
• 神经元
• 自噬

目的：基于肠道神经元自噬探讨电针大肠合募配穴治疗功能性便秘（FC）的作用机制。方法：将40只SPF级昆明小鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组以及3-MA+针刺组5组，每组8只。除对照组外，其余4组小鼠采用复方地芬诺酯混悬液灌胃14 d制备FC模型。造模成功后，针刺组、3-MA+针刺组电针双侧“天枢”“上巨虚”，予疏密波，频率3 Hz/15 Hz，电流强度1 mA，每次30 min，每日1次，5 d为一疗程，疗程之间休息2 d，共治疗2个疗程。3-MA组及3-MA+针刺组于电针前30 min予3-MA溶液腹腔注射（15 mg/kg），每日1次。分别于干预前后观察各组小鼠首粒黑便排出时间和6 h排便情况。干预后计算各组小鼠小肠推进率；HE染色法观察小鼠结肠组织形态；透射电镜观察小鼠肠道神经元自噬情况；免疫组化法检测小鼠结肠肌层神经元微管相关蛋白1轻链3 (LC3)、Beclin-1、神经元核抗原蛋白（NeuN）表达。结果：干预前，与对照组比较，模型组、针刺组、3-MA组及3-MA+针刺组小鼠首粒黑便排出时间延长（P<0.01,P<0.05）,6 h排便粒数减少（P<0.01）,6 h粪便湿重降低（P<0.01,P<0.05）,6 h粪便含水率下降（P<0.05,P<0.01）。干预后，与对照组比较，模型组小鼠首粒黑便排出时间延长（P<0.05）,6 h排便粒数减少（P<0.01）,6 h粪便湿重降低（P<0.01）,6 h粪便含水率下降（P<0.01）；与模型组比较，针刺组首粒黑便排出时间缩短（P<0.01）,6 h排便粒数增多（P<0.01）,6 h粪便湿重增加（P<0.01）,6 h粪便含水率升高（P<0.01）；与针刺组比较，3-MA+针刺组小鼠首粒黑便排出时间延长（P<0.01）,6 h排便粒数减少（P<0.01）,6 h粪便湿重降低（P<0.01）,6 h粪便含水率下降（P<0.01）。各组小鼠结肠组织各层结构均正常、完整。与对照组比较，模型组小鼠小肠推进率及结肠肌层神经元LC3、Beclin-1、NeuN平均吸光度值降低（P<0.01），自噬小体减少；与模型组比较，针刺组小肠推进率及结肠肌层神经元LC3、Beclin-1、NeuN平均吸光度值升高（P<0.01,P<0.05），自噬小体增多；与针刺组比较，3-MA+针刺组小肠推进率及结肠肌层神经元LC3、Beclin-1、NeuN平均吸光度值降低（P<0.05,P<0.01）。结论：电针可促进肠道神经元自噬，增加神经元数量，从而增加FC模型小鼠肠道运动，改善便秘症状。

• 单位
  成都中医药大学