摘要

目的:研究采用人脐带间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)治疗肝细胞氧化应激损伤中微小RNA(miRNA)的差异性表达并探讨其调控机制。方法:制备人正常肝细胞株L02氧化应激损伤模型,体外分离培养健康人脐带间充质干细胞并制备MSC-CM。损伤模型经MSC-CM治疗,用凋亡、细胞活力、细胞周期及线粒体膜电位等实验验证其治疗效果。定量RT-q PCR筛选差异性表达miRNA。应用生物信息学预测其靶蛋白后使用Western blot实验验证。结果:MSC-CM治疗可以显著减少H2O2氧化应激损伤所致的细胞凋亡比率,增加细胞活力,调节细胞周期。经RT-q PCR筛选出显著差异表达的miR-143、miR-145、miR-301a与let-7a,均在损伤后表达升高,而在MSC-CM作用后表达降低。Western blot实验结果显示miR-143的预测靶蛋白HK2和ADRB1的表达在肝细胞损伤后降低,MSC-CM作用后升高,与miR-143调控趋势一致。结论:MSC-CM治疗可能通过调节相关miRNA及其靶蛋白逆转H2O2所致肝细胞氧化应激损伤。