摘要
目的探讨纳米粒作为基因治疗载体的可行性,并研究载ATM反义寡核苷酸纳米粒抑制ATM基因表达对小鼠SCCⅦ细胞放射敏感性的影响。方法采用W/O/W双乳化溶剂蒸发法制备载ATM寡核苷酸纳米粒,并检测其理化性质;载ATM寡核苷酸纳米粒转染SCCⅦ细胞,RT-PCR检测细胞ATM mRNA表达水平;应用细胞克隆形成试验检测细胞放射敏感性,通过流式细胞学检测细胞周期分布和凋亡情况。结果制备的纳米粒呈圆形,分散性好(PDI=0.108±0.052),粒径平均值为(116±25.2)nm,包封率达(87.5±4.3)%;转染ATM反义寡核苷酸纳米粒组SCCⅦ细胞ATM mRNA表达有明显下调(P<0.05);转染ATM反义寡核苷酸纳米粒组SCCⅦ细胞放射后细胞存活能力明显低于对照组(P<0.05);流式细胞学检测结果显示转染ATM-ASODN-NP的细胞接受放射治疗后,G2期细胞比例与对照组相比有明显下降,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论纳米粒作为基因治疗的载体有效可行,具有较好的应用前景,ATM基因表达下调导致SCCⅦ细胞放射敏感性提高。
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单位四川大学华西医院; 四川大学