外泌体介导miR-519c-5p增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用

作者：黄发; 吕嘉贤; 许静红; 姚纪友; 童荔; 胡晓光; 朱艳平; 曹璐; 蔡常洁^*

来源：实用医学杂志, 2020, 36(06): 722-728.

• 外泌体
• 脓毒症
• 凋亡
• 人脐带静脉内皮细胞
• miRNA

目的探讨外泌体介导的miR-519c-5p是否能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用。方法收集大量人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)上清液,通过超速离心法制备大量外泌体(exosomes),制备大量无任何处理的blank-exosomes和过表达miR-519c-5p的miR-519c-5p-exosomes;同时予以LPS 10μg/mL刺激HUVECs 6 h构建脓毒症模型,再与分别与上述两种外泌体共培养12 h。实验设立3个组:HUVECs+blank-exosomes为空白组,HUVECs+LPS+blank-exosomes、HUVECs+miR-519c-5p-exosomes为对照组,HUVECs+LPS+miR-519c-5p-exosomes为实验组。通过qRT-PCR法检测miR-519c-5p在外泌体及HUVECs中的表达,通过CCK-8法与流式细胞术分别检测各组内皮细胞增殖和凋亡的情况。结果经qRT-PCR验证转染的过表达exosomes较blank-exosomes与mimic NC-exosomes miR-519c-5p表达升高约13倍(P <0.001)。同时,CCK-8测得实验组OD值均低于空白组和对照组(0.458 vs. 1.388,0.458 vs. 0.843,P <0.05),流式细胞术测得实验组细胞凋亡比例均高于空白组和对照组(7.197%vs. 0.647%,P <0.001;7.197%vs.3.423%,P=0.001)。结论外泌体介导的miR-519c-5p能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 广州市第一人民医院