基于RAA-CRISPR/Cas12a的鸡毒支原体核酸检测方法的建立

作者：王剑; 赵普润; 崔嘉窈; 霍乃蕊^*

来源：东北农业大学学报, 2023, 54(10): 28-35.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2023.10.004

• 鸡毒支原体
• CRISPR
• RAA
• 核酸检测

将重组酶介导的扩增技术（RAA）、CRISPR/Cas12a的切割反应及酶标仪或试纸条相结合，建立设备依赖度低的鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）核酸检测方法。以MG基因mgc2为靶标，设计CRISPR RNA及RAA引物，并优化检测体系、评价新建核酸检测方法性能。结果表明，该方法特异性和灵敏性均较好，对除MG外其他常见病原体检测结果均为阴性，检测下限可达10 copies·μL-1。与商业化荧光定量PCR试剂盒对比检测45份临床样品符合率超过93%。综上，通过将RAA与CRISPR/Cas12a相结合，建立一种不依赖昂贵仪器的MG核酸检测方法，具有良好应用前景。

• 单位
  山西农业大学