糖尿病微血管并发症动物模型的制备与评价

作者：郑菀睿; 王瑞; 罗向霞^*; 周茹玉; 杨芮; 曾敏; 洪卓民; 顾丽萍

来源：中华眼底病杂志, 2023, 39(09).

• 糖尿病微血管病变
• 动物模型
• 评价

目的建立糖尿病微血管病变大鼠模型, 模拟糖尿病视网膜及肾微血管病变的生化及病理改变。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只, 随机分为空白组、模型组, 分别为10、30只。空白组、模型组大鼠分别给予普通饲料、高脂高糖饲料喂养5周后, 模型组大鼠按体重35 mg/kg剂量经腹腔单次注射1%链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型。建模后持续喂养至第10周(建模后4周), 观察大鼠一般情况, 采集样本进行后续实验。采集大鼠动脉血、尿样标本检测血肌酸酐(CREA)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及尿微量白蛋白、尿肌酐(UCr)、尿糖;计算肾脏指数、微量尿白蛋白/尿肌酐比值(UACR)。光相干断层扫描血管成像(OCTA)观察大鼠视网膜浅层毛细血管丛血管变化及无灌注区情况;苏木精-伊红、高碘酸-雪夫染色观察大鼠肾脏、视网膜形态结构变化;免疫荧光染色观察大鼠视网膜Müller细胞神经纤维及细胞核表达情况;透射电子显微镜观察视网膜组织超微结果。组间比较采用独立样本t检验。结果建模后4周, 与空白组比较, 模型组大鼠体重显著降低, 随机血糖显著升高, 差异有统计学意义(t=5.755、-51.291, P<0.05);肾脏指数、尿糖、UACR显著升高, UCr显著降低, 差异有统计学意义(t=10.878、137.273、3.482、-6.110, P<0.05);CREA降低, TG、TC、HDL-C、LDL-C升高, 差异均有统计学意义(t=-28.012、33.018、118.018、13.585、16.480, P<0.05)。OCTA检查可见视网膜浅层毛细血管无灌注区。光学显微镜观察发现, 模型组大鼠视网膜内界膜肿胀、增厚, 表面不平, 内、外核层细胞排列紊乱, 密度降低;肾小球充血伴皮质管状上皮肿胀, 肾小球系膜区增宽, 基底膜增厚。免疫染色结果显示, 模型组大鼠视网膜内、外丛状层呈片状强绿色荧光表达, 内、外核层呈散在点状绿色荧光表达。透射电子显微镜发现, 模型组大鼠视网膜微血管基底膜轻度增厚, 血管内皮细胞水肿, 内皮细胞核及周细胞核固缩、核膜皱缩, 线粒体轻度肿胀, 空泡化。结论高糖高脂喂养联合单次腹腔注射STZ 35 mg/kg可成功建立2型糖尿病微血管病变模型。

• 单位
  甘肃中医药大学; 甘肃省中医院