BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

作者：易娜; 袁李礼^*

来源：天津医药, 2021, 49(08): 791-795.

• 肌细胞,心脏
• 过氧化氢
• 氧化性应激
• ARNTL转录因子类
• NF-E2相关因子2
• 血红素加氧酶-1
• 节律基因BMAL1

目的探讨节律基因BMAL1对过氧化氢(H2O2)诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法构建BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。(1)实验1。对照组、H2O2组(0.2 mmol/L的H2O2处理24 h)、BMAL1过表达(BMAL1-OE)组(BMAL1稳定过表达H9C2细胞)、BMAL1过表达+H2O2(BMAL1-OE+H2O2)组(0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h)。(2)实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表达+抑制NRF2+H2O2(BMAL1-OE+ML385+H2O2)组(NRF2抑制剂2μmol/L的ML385预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h)、BMAL1过表达+抑制HO-1+H2O2(BMAL1-OE+Znpp+H2O2)组(HO-1抑制剂5μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h)。CCK-8法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、TBA法检测丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测BMAL1、核因子E2相关因子2(NRF2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果 (1)与Control组相比,BMAL1-OE组BMAL1 m RNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低(P<0.05);与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性增加,MDA含量减少,而BMAL1、NRF2和HO-1蛋白相对表达水平升高(P<0.05);(2)与BMAL1-OE+H2O2组相比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.05)。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。

• 单位
  湖南省脑科医院; 长沙市第四医院