OptiPrep密度梯度分离液分离培养小鼠原代肝星状细胞的实验研究

作者：黄会芳; 邓志华; 严微; 黄卓; 姚佳心

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2022, 31(10): 1160-1165.

• 原代肝星状细胞
• OptiPrep密度梯度分离液
• 分离培养

目的 寻找分离培养小鼠原代肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)的有效方法。方法 采用OptiPrep密度梯度分离液对BALB/c雄性小鼠HSC进行原位手工灌注分离培养。倒置荧光显微镜观察HSC自发荧光、油红O染色，α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及结蛋白(Desmin)免疫细胞化学染色鉴定原代细胞及传代培养的细胞。结果 我们分离出高得率和高纯度的原代HSC,在倒置显微镜下328 nm波长的紫外光激发下自发蓝绿色荧光，油红O染色胞浆中脂滴呈红色，细胞核呈蓝色；在传2代培养的HSC中，α-SMA、Desmin染色阳性细胞胞浆为棕色颗粒，达100%阳性，全部活化。结论 OptiPrep密度梯度分离液分离培养出高纯度、高得率的原代HSC。

• 单位
  山西医科大学第一医院; 山西医科大学第二医院