烟草黄瓜花叶病毒一步法RT-PCR检测试剂盒的研制与初步应用

作者：张俊祺; 刘相兵; 罗朝鹏; 杨军; 宋纪真; 尹启生; 宋浩

来源：烟草科技, 2011, (10): 65-69.

• 黄瓜花叶病毒
• RT-PCR
• 检测试剂盒
• 特异性
• 稳定性
• 灵敏度 Cucumber mosaic virus(CMV)
• RT-PCR
• Detection kit
• Specificity
• Stability
• Sensitivity

为快速准确地检测烟草黄瓜花叶病毒(CMV),根据黄瓜花叶病毒基因组序列相对保守区域设计了一对特异性引物,整合了反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件的优化,建立了基于一步法RT-PCR检测烟叶感染CMV的方法,在此基础上组装了检测试剂盒。进一步分析了该试剂盒的特异性、稳定性和检测灵敏度。结果表明,该试剂盒具有很强的特异性、良好的重复性和较高的灵敏度(模板RNA浓度最低达到10 ng量级)。初步应用结果显示,在多个烟区采集的病叶样品检测结果均与ELISA检测结果一致,能够成功检测出CMV。

• 单位
  中国烟草总公司郑州烟草研究院; 湖南中烟工业有限责任公司