细胞自噬缓解氧-糖剥夺诱导原代培养小鼠脑皮质神经元缺血损伤

作者：陈璐勔; 罗艳琳; 赵丽; 韩松; 李淑娟; 李俊发

来源：基础医学与临床, 2014, 34(12): 1611-1615.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2014.12.011

• 原代培养脑皮质神经元
• 氧-糖剥夺(OGD)
• 细胞自噬
• 巴弗洛霉素A1(BafA1)
• 缺血性损伤

目的在离体细胞水平,探讨氧-糖剥夺(OGD)致原代培养小鼠脑皮质神经元缺血损伤过程中,细胞自噬的变化情况和可能作用。方法出生24 h内C57BL/6J乳鼠脑皮质神经元原代培养7 d后,分为常氧(Nor.)、15、30、60、90和120 min OGD后24 h复糖复氧等6组,每组n=6;免疫印迹(Western blot)法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1表达和LC3Ⅱ/Ⅰ比值;借助MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测神经元的损伤;用细胞自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(Baf A1100 nmol/L)抑制自噬后,观察神经元的损伤。结果与对照组相比,随OGD时间的延长,自噬相关蛋白Beclin-1表达水平和LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著升高,30 min达到峰值,之后略有回降(P<0.05);在OGD处理30和60 min致使神经元显著损伤的基础上,细胞自噬抑制剂Baf A1可明显加重60 min OGD处理神经元的损伤和提高LC3Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05)。结论 OGD可诱发原代培养小鼠脑皮质神经元自噬发生,且细胞自噬可缓解OGD处理皮质神经元的缺血损伤。

• 单位
  神经内科; 首都医科大学附属北京朝阳医院; 首都医科大学