十六种鸟类二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记

作者：林树柱; 杨帆; 刘先菊; 张连峰

来源：中国比较医学杂志, 2011, (06): 1-5.

• 鸟类
• IgY
• 二级抗体
• 辣根过氧化物酶 Bird
• IgY
• Secondary antibody
• HRP

目的制备兔抗16种鸟类的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为鸟类血清学检测系统的建立提供工具。方法采用水稀释法粗纯抗体后,再利用改良的饱和硫酸铵分级沉淀法,或亲和层析结合饱和硫酸铵沉淀法,或饱和硫酸铵沉淀法结合SDS-PAGE凝胶切胶纯化的方法进一步纯化鸟类的IgY,利用纯化的IgY免疫大耳白兔制备抗血清,用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗鸟类的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗鸟类的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blots考察标记抗体的特异性。结果纯化了灰雁、鸬鹚、鸵鸟、小鹈、...

• 单位
  国家中医药管理局; 中国医学科学院北京协和医学院