幼年和成年猪松质骨脱细胞基质有机成分和成骨诱导能力的比较

作者：郭蕊; 宋楠; 潘昊; 林贤丰; 金可可^*

来源：温州医科大学学报, 2021, 51(05): 345-351.

DOI：10.3969/j.issn.2095-9400.2021.05.001

• 幼年松质骨脱细胞基质
• 生长因子
• 成骨诱导

目的:比较幼年和成年猪松质骨脱细胞基质(DCBM)的成骨特性。方法:制备幼年和成年猪DCBM并验证脱细胞效果。胶原和糖胺聚糖(GAGs)定量检测、Masson三色和阿利新蓝染色评估脱细胞前后胶原和GAGs含量及分布。免疫组化检测松质骨基质中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和骨钙蛋白(OCN)的分布情况。q PCR检测幼年和成年DCBM诱导复植间充质干细胞(MSC)的I型胶原(ColI)、碱性磷酸酶(ALP)、BMP-2和OCN等成骨分化指标的基因表达。纳米液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析DCBM的蛋白组成。结果:定量分析显示,幼年松质骨较成年松质骨在脱细胞前后胶原和GAGs含量更高。幼年松质骨脱细胞前后BMP-2、MMP-13、OCN等的表达均高于成年松质骨。成骨诱导实验显示复植于幼年DCBM的MSC,ALP、Col-I等的m RNA的表达量高于复植于成年DCBM。蛋白质谱GO分析和丰度分析显示幼年DCBM较成年DCBM肽链种类丰富,包含成纤维细胞生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子等促骨生长细胞因子。结论:同等条件下制备的幼年DCBM与成年猪DCBM比较含有更丰富的促骨生长细胞因子,具有更强的成骨诱导性能。

• 单位
  浙江大学医学院附属邵逸夫医院; 温州医科大学; 基础医学院