不同抗凝剂对富血小板血浆释放生长因子及引起SD大鼠注射疼痛的影响比较

作者：陈莉; 刘广亚; 许育兵; 朱展鸿; 李艳辉; 单桂秋; 周谋^*

来源：中国输血杂志, 2023, 36(08): 660-664.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2023.08.002

• 抗凝剂
• 富血小板血浆
• Plt计数
• 生长因子
• 注射疼痛

目的 探讨不同抗凝剂对富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)释放生长因子含量及引起注射疼痛的影响比较。方法 选取无偿献血者15名，每位献血者同时使用4种抗凝管(EDTA-K2抗凝、EDTA-NA2抗凝、枸橼酸钠抗凝、ACD-A抗凝管),分为4组，使用富浆法分离制备PRP,应用酶联免疫吸附试验法检测激活后的PRP中血小板源性生长因子-AA(platelet derived growth factor AA,PDGF-AA)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1),血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和血小板因子4(platelet factor 4,PF-4)的含量；同时使用4组制备的PRP及PG上清液与对照组生理盐水对SD大鼠(20只，4只/组)进行皮下或者皮内注射。观察并记录SD大鼠在注射过程中的疼痛状态，依据美国实验动物疼痛指南评估5组实验动物的疼痛状态。结果 PRP中血小板计数比较：D组最高(1 294.53±277.37)×109/L,与A组(789.13±377.13)×109/L和C组(990.94±493.12)×109/L比较，P<0.05,差异具有统计学意义；生长因子检测OD值比较：A、B、C、D,4组PDGF-AA的OD值为：1.51±0.18、1.69±0.21、0.66±0.19、1.72±0.13,组间差异具有统计学意义(P<0.05),D组优于其他3组；PF-4的OD值为：1.18±0.24、1.61±0.14、0.65±0.26、1.72±0.10,组间差异具有统计学意义(P<0.05),D组优于其他3组；IGF-1检测的OD值为：1.02±0.08、0.98±0.11、1.06±0.11、1.32±0.65,组间差异无统计学意义(P>0.05);VEGF检测的OD值为：0.13±0.04、0.21±0.14、0.08±0.02、0.13±0.04,B、C 2组间差异具有统计学意义(P<0.05);TGF-β检测的OD值为：0.14±0.01、0.15±0.01、0.28±0.17、1.10±0.37,组间差异具有统计学意义(P<0.05),D组优于其他3组；动物注射疼痛感比较：注射PRP和PG上清液时，A、B、C、D,4组与对照组生理盐水比较差异均具有统计学意义(P<0.05);注射PRP时，A、B、C、D,4组的疼痛评分的中位数为：6(1.5)、5(0.75)、4.5(2.5)、3(3),D组<其余3组，组间差异无统计学意义(P>0.05);注射PG上清液组，A、B、C、D,4组的疼痛评分的中位数为：4(2.25)、3(2.75)、4(3)、 1(1.5),差异无统计学意义(P>0.05);注射PRP组与PG上清液组2组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 使用ACD-A抗凝剂两步离心法制备PRP,可以得到较高的血小板计数，同时可以得到最大的PDGF-AA、PF-4、IGF-1、TGF-β 4种生长因子释放量。在疼痛方面，ACD-A抗凝剂的动物注射痛感最低。