RNA干扰对烟草NtPPO8基因沉默的效应分析

作者：姚怡帆; 代卓毅; 江智敏; 徐敏; 李芳芳; 张希; 党伟; 武兆云; 丁永乐; 杨铁钊^*

来源：作物杂志, 2022, (03): 80-86.

DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2022.03.011

• RNA干扰
• 多酚氧化酶
• 病毒诱导的基因沉默
• 烟草
• VIGS

多酚氧化酶（PPO）是发生酶促褐变的关键酶，PPO活性过高会使烟叶变褐。为明确烟草Nt PPO8基因对PPO活性的影响，建立降低Nt PPO8基因表达量的病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）体系，探究使用RNA干扰技术对烟叶NtPPO8基因表达量及PPO活性的影响。以中烟100和K326为材料，分析在移栽后50d进行VIGS载体侵染的植株，并在侵染后10、20、30、40d分别测定Nt PPO8基因表达量及PPO活性。结果表明，接种VIGS载体的转化植株，其中在侵染后20d时NtPPO8基因的沉默效率最高，为78.46%；随着侵染时间推移，NtPPO8基因的沉默效率逐渐降低，在接种后40d内有效表达；且转化植株中的病毒载体会随着植株的生长而向上传导，随着接种部位的上移，沉默效率逐渐降低。因此，研究建立VIGS体系能够有效沉默NtPPO8基因的表达，并且有效降低PPO活性，为提高烟叶耐烤性及降低烟叶褐变比例提供了新的思路和方法。

• 单位
  河南农业大学; 中国烟草总公司河南省公司; 浙江中烟工业有限责任公司; 陕西中烟工业有限责任公司