摘要
目的:通过上调miR146a表达探究扶正消岩汤对乳腺癌细胞微环境中M1型和M2型巨噬细胞相关因子的影响,为扶正消岩汤抗乳腺癌作用机制的研究提供科学依据。方法:CCK-8实验测定不同作用时间和不同浓度扶正消岩汤含药血清对4T1乳腺癌细胞的抑制作用。通过细胞转染使4T1细胞miR-146a过表达,测细胞转染后对细胞增殖的影响。ELISA法检测miR-146a过表达对乳腺癌4T1细胞上清液中M1、M2特异蛋白IL10、IL12、CD86、CD163、TNF-α、IL-1β的影响及炎症和凋亡相关因子Caspase3、Caspase9、NF-κB、RAF-6、IRAK-1的影响。结果:CCK-8实验结果表明,扶正消岩汤可有效抑制4T1细胞增殖,且随药物浓度增加而增强;细胞转染后FZXYT+miR-146a过表达组抑制4T1细胞增殖的效果优于单纯中药组和单纯上调miR-146a组(P<0.01);ELISA法测细胞上清液中细胞因子含量结果显示扶正消岩汤+miR146a过表达组IL12、CD86含量显著升高(P<0.01),IL10、CD163含量显著降低(P<0.01),同时上调促凋亡因子Caspase3、Caspase9的表达(P<0.05,P<0.01),下调RAF-6、IRAK-1、TNF-α、IL-1β、NF-κB(P<0.05,P<0.01)。结论:扶正消岩汤逆转肿瘤由M2期向M1期的转变从而抑制乳腺癌恶化进展的作用机制可能是通过上调miR146a表达从而抑制NF-κB通路中TNF-α、IL-1β、NF-κB、RAF-6、IRAK-1因子的作用,促进促凋亡因子Caspase3、Caspase9的表达来调控乳腺癌的发展。
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