铁棍山药微型块茎遗传转化体系的建立

作者：李俊华; 刘世宇; 李成龙; 韩林林; 董亚辉; 张晓丽; 赵喜亭; 李明军^*

来源：植物学报, 2019, 54(01): 72-80.

• 根癌农杆菌
• 遗传转化
• 微型块茎
• 铁棍山药

怀山药(Dioscorea opposita)遗传转化是对其进行基因功能分析和遗传改良的基础,但目前国内外尚未见相关报道。以怀山药优良品种铁棍山药(D. opposita cv.‘Tiegun’)的微型块茎为受体材料,对影响遗传转化的因素进行优化,建立了由根癌农杆菌介导的山药遗传转化体系。过表达质粒载体p CAMBIA1301-DoSERK2含GUS标记基因和潮霉素(Hyg)抗性筛选基因,沉默质粒载体pART27-DoSERK2含卡那霉素(Kan)抗性筛选基因。根癌农杆菌抑制剂特美汀(Tim)的最佳浓度为500mg·L–1;再生芽和生根时, Hyg的最佳浓度分别为15和20 mg·L–1, Kan的最佳浓度分别为120和160 mg·L–1。对转化植株进行PCR和GUS组织化学检测,结果显示外源基因已整合到铁棍山药转基因株系的基因组中并在细胞中表达。该研究建立了一套取材便利的铁棍山药遗传转化方法,对其它品种山药的转化也具有参考价值。

• 单位
  河南师范大学; 生命科学学院