摘要

目的探讨miR-1246水平变化对人宫颈癌SiHa细胞上皮-间质转化(EMT)及其增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法体外向SiHa细胞分别转染miR-1246模拟物(miR-1246-mimics组)及阴性对照(mimics-NC组)、miR-1246抑制物(miR-1246-inhibitor组)及阴性对照(Inhibitor-NC组),以未作处理的SiHa细胞为空白对照组。通过流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染效率。采用Western blotting检测转染后细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Twist-2蛋白的表达水平。通过CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室实验和划痕实验检测转染后SiHa细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移能力。结果流式细胞术结果显示,各组细胞转染效率均在90%以上。qRT-PCR结果显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1246-mimics组miR-1246的相对表达量显著增高,而miR-1246-inhibitor组明显降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与阴性对照组比较,miR-1246-mimics组E-cadherin蛋白表达水平降低而N-cadherin、Vimentin和Twist-2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而miR-1246-inhibitor组E-cadherin蛋白表达水平增加而N-cadherin、Vimentin和Twist-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-1246-mimics组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著提高(P<0.05),而细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与阴性对照组比较,miR-1246-inhibitor组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著提高(P<0.05)。结论过表达miR-1246可能通过EMT促进宫颈癌SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移并诱导细胞凋亡。

  • 单位
    广西医科大学附属肿瘤医院