细胞培养流感病毒H5N1的纯化方法研究

作者：张哲罡; 罗丹; 张家友; 赵巍; 王英; 邱冉; 孟子延; 韩天; 夏志武; 李长贵; 杨晓明^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2019, (12).

• 流感病毒
• MDCK细胞
• 宿主蛋白
• 宿主DNA
• 纯化

目的 降低H5N1甲型流感病毒中宿主细胞残留蛋白质和DNA含量。方法 首先使用Core 700分子筛去除宿主残留蛋白质,再使用Capto Q阴离子交换层析柱去除宿主残留DNA,对多批次MDCK细胞培养的H5N1病毒液进行纯化。纯化后的病毒液经荧光定量PCR、血凝试验、单扩试验等结果综合评价纯化效果。除层析外,本实验还设置了广谱核酸酶对照组。结果 在不使用广谱核酸酶的条件下,宿主DNA去除率为99.62%,宿主蛋白质残留去除率为98.1%,血凝素(HA)抗原回收率为66.96%。结论 本研究提供了一套对于以细胞基质制备的流感疫苗有较好效果的纯化策略,宿主细胞的DNA和蛋白质有较高去除率,且HA回收率较高,纯化结果不劣于添加广谱核酸酶的方法,有可能应用于实际疫苗生产。

• 单位
  武汉生物制品研究所; 中国食品药品检定研究院