利用核糖体基因区打靶载体靶向表达改造型人凝血因子Ⅷ

作者：刘雄昊; 刘慕君; 佘华; 文路; 薛志刚; 梁德生; 蔡芳; 潘乾; 龙志高; 邬玲阡; 戴和平; 夏昆; 夏家辉

来源：科学通报, 2005, 50(18): 46-51.

DOI：10.3321/j.issn:0023-074X.2005.18.009

• 人源基因载体
• 定点整合
• 靶向表达
• 改造型人凝血因子Ⅷ

构建了携带改造型hFⅧ(hFⅧ-BDDAK39)的核糖体基因区靶向表达载体pHrneo-BDDAK39,并将其转入人纤维肉瘤细胞(HT1080),检测其定点整合的能力及hFⅧ-BDDAK39的表达情况.结果显示,pHrneo-BDDAK39能够成功地将hFⅧ-BDDAK39靶入到HT1080细胞的核糖体基因区,定点整合效率达到2.0×10~(-5),并且靶入的hFⅧ-BDDAK39能有效表达,表达量为(32±5)ng·10~6细胞~-1·24h~(-1).这为利用此靶向表达载体进行血友病A的基因治疗提供了重要的实验依据.

• 单位
  医学遗传学国家重点实验室; 中南大学