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摘要
研究旨在优化红娘子蛋白提取工艺，考察红娘子生品及炮制品蛋白成分对肝癌细胞Bel-7402的影响。蛋白含量为评价指标，考察料液比、超声时间、溶液pH对红娘子蛋白提取的影响，通过正交试验优选最佳提取工艺。体外研究红娘子生品及炮制品蛋白成分对Bel-7402肝癌细胞的影响，Cell Counting Kit-8检测对细胞活力影响；细胞集落研究对细胞增殖能力影响；划痕试验检测对细胞迁移能力影响；Annexin V-FITC/PI双染法检测对细胞凋亡影响；Western Blotting检测凋亡作用机制。娘子蛋白最佳提取工艺为：红娘子粉末加20倍体积水溶液（pH10.8），冰水浴超声提取150 min。生品及炮制品蛋白可显著降低Bel-7402肝癌细胞存活率；具有良好的抑制肝癌细胞增殖能力；可显著抑制肝癌细胞迁移；显著增加Bel-7402肝癌细胞凋亡率；可促进凋亡相关蛋白BCL2-Associated X（Bax）和Caspase-3表达，降低B-cell lymphoma-2（Bcl-2）蛋白表达。化的红娘子蛋白提取工艺稳定，蛋白含量可达240.55 mg/g。红娘子生品及炮制品蛋白成分均具有较好的抑制Bel-7402肝癌细胞迁移及增殖的能力，其机制可能是通过上调抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达、下调促凋亡蛋白Bax蛋白表达，激活Caspase级联反应，上调效应子Caspase-3蛋白表达，从而促进细胞凋亡，且炮制品蛋白效果优于生品蛋白。
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