DNA甲基转移酶1基因低表达的人支气管上皮细胞基因组甲基化水平的体外试验

作者:杨淋清; 刘庆成; 龚春梅; 陶功华; 刘建军; 胡恭华; 黄海燕; 王昆鹏; 庄志雄
来源:中华劳动卫生职业病杂志, 2011, 29(3): 194-197.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2011.03.010

摘要

目的 观察人支气管上皮细胞(16HBE)的DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因低表达细胞株细胞周期和基因组整体甲基化水平的改变.方法 用慢病毒介导的RNA干扰方法将4个不同的短发夹RNA片段转染16HBE细胞,并用免疫印迹法(Western blotting)检测该细胞DNMT1蛋白表达水平,用流式细胞仪和5-甲基胞嘧啶(5-mC)免疫荧光法检测该细胞的细胞周期和细胞基因组整体甲基化水平.结果 16HBE-shDNMT1-4细胞株的DNMT1蛋白表达与对照组相比平均降低约44%,差异有统计学意义(P<0.05),但细胞周期和基因组整体甲基化水平无明显改变.结论 成功建立DNMT1基因低表达的16HB细胞株,其细胞周期和基因组整体甲基化水平无明显改变.

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