呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备

作者：向江艳; 詹炉停; 赵敏; 张伟; 郑子峥^*; 夏宁邵

来源：中国免疫学杂志, 2018, 34(09): 1354-1359.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2018.09.015

• 呼吸道合胞病毒
• L蛋白
• 单克隆抗体
• 肽段展示

目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫68周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 IgG1、IgG2a和IgG3单抗各3株,IgG2b单抗2株。结论:成功制备了L蛋白特异性单克隆抗体,也为RSV感染的免疫和发病机制研究奠定基础。

• 单位
  厦门大学