逆转录交叉引物等温扩增检测南方菜豆花叶病毒方法的建立

作者：王道; 张蓬军; 胡学难; 魏霜; 孙凯; 杨倩倩^*; 俞晓平^*

来源：植物检疫, 2022, 36(01): 39-44.

DOI：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2022.01.002

• 南方菜豆花叶病毒
• 等温扩增技术
• 交叉引物扩增
• 检测

南方菜豆花叶病毒（southern bean mosaic virus,SBMV）是我国进境植物检疫性病毒，可随豆类种子远距离传播。本研究针对SBMV的外壳蛋白（coat protein,CP）基因序列设计特异引物组，建立了一种反转录（reverse transcription,RT）交叉引物扩增（cross-priming amplification,CPA）快速检测方法，并分别结合实时荧光和侧向层析试纸条（lateral flow dipstick,LFD）检测扩增产物构建了实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD体系。结果显示，所建立的针对SBMV的RT-CPA检测方法特异性强，以其他4种可随豆类种传的植物检疫性病毒为对照，均无交叉反应。其中，实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD检测SBMV灵敏度分别达5×10-4ng/μL和5 ng/μL。所建立的RT-CPA检测SBMV方法具有快速、准确、可视化等优点，在口岸检测中具有良好的应用前景。

• 单位
  生命科学学院; 广州海关技术中心