微RNA-27a介导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制

作者：谢军; 韩造木; 尹琬凌

来源：安徽医药, 2019, 23(12): 2378-2381.

• 代谢综合征X
• 胰岛素抵抗
• 微RNAs
• microRNA 27a
• 外泌体
• 抵抗素
• 过氧化物酶体增殖物激活受体
• 脂细胞
• 3T3-L1脂肪细胞

目的研究微RNA-27a(miR-27a)介导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法将3T3-L1细胞诱导分化为脂肪细胞,采用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)法建立3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,检测miR-27a对3T3-L1细胞葡萄糖摄取的影响,蛋白质印迹法(Western Blot)检测miR-27a对胰岛素信号通路的影响。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)及双荧光素酶报告基因检测法检测miR-27a的作用靶点。结果 miR-27a介导了3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗[正常对照组,模型组,miR-27a mimics+模型组,miR-27a inhibitor+模型组四组的吸光度值分别为(2.03±0.20),(1.28±0.27),(1.43±0.20),(1.97±0.18),P<0.01],蛋白质印迹法显示miR-27a抑制了胰岛素信号通路中胰岛素受体底物1(IRS1)及Akt蛋白的磷酸化。qPCR显示miR-27a抑制了过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达[对照组和mir-27a组的相对值分别为(1.00±0.08)和(0.59±0.14),P=0.0048],双荧光素酶报告基因检测验证了PPARγ为miR-27a的作用靶点[PPARγWT+miR-NC,PPARγWT+miR-27a,PPARγMut+miR-NC,PPARγMut+miR-27a四组的相对荧光值分别为(5.37±0.80)、(3.17±0.57)、(4.94±0.63)、(4.68±0.74),P<0.01]。结论 miR-27a通过抑制胰岛素信号通路及靶向PPARγ介导3T3-L1细胞胰岛素抵抗。

• 单位
  华中科技大学; 同济医学院附属武汉中心医院