结核菌重组基因rBCG-Rv2029c的克隆表达及免疫原性分析

作者：薛士鹏; 王涵; 薛婷; 党颍徐; 夏西超^*

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(13): 1604-1608.

• 结核分枝杆菌
• Rv2029c
• 克隆
• 免疫

目的:用结核分枝杆菌特异性抗原Rv2029构建结核重组疫苗(BCG-Rv2029),在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应,并初步探讨其免疫机制。方法:PCR扩增基因Rv2029,构建重组质粒pMV261-Rv2029,转入卡介苗感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv2029蛋白。以重组的rBCG-Rv2029c活疫苗为免疫原,皮下免疫C57BL/6小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血抗原特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,XTT检测脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应,流式细胞仪观察CD4+T和CD8+T细胞比例变化,IFN-γ、IL-2检测试剂盒检测细胞培养基中细胞因子表达水平。结果:成功构建重组疫苗BCG-Rv2029C,并诱导表达重组蛋白。经免疫小鼠后,重组卡介苗rBCG-Rv2029c能诱导较BCG更高的IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,IgG2a/IgG1的变化提示rBCG-Rv2029c可诱导Th1型免疫反应。与BCG相比,rBCG-Rv2029c可诱导产生更强的特异性细胞增殖反应、刺激产生更多的杀伤性CD8+ T细胞和CD4+ T细胞、能诱导产生更高水平的IFN-γ、IL-2细胞因子。结论:重组结核病疫苗rBCG-Rv2029c可诱导产生较BCG更强且针对休眠MTB的特异性体液免疫和细胞免疫,是一株值得深入研究的新型结核病疫苗。

• 单位
  平顶山学院; 南阳医学高等专科学校