FQ-PCR与IMSA检测转基因豆奶外源基因的比较研究

作者：乐振窍; 许泽仰; 张细玲; 陈慧国; 祖新^*

来源：大豆科学, 2018, 37(06): 943-954.

• FQ-PCR
• IMSA
• 豆奶
• 外源基因
• 灵敏度
• 特异性

为比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与等温多自配引发扩增(IMSA)技术检测转基因豆奶中外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度和特异性。合成CaMV35S、NOS以及EPSPS基因的质粒,通过FQ-PCR与IMSA检测定量的质粒,比较质粒灵敏度;按0. 50%、0. 10%、0. 05%以及0. 01%的比例制作转基因豆奶,通过FQ-PCR与IMSA检测转基因大豆标准品制成的豆奶,比较样品灵敏度和特异性。结果表明:IMSA检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度分别为31. 01,31. 01,3. 10 cps·μL-1,FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度皆为31. 01cps·μL-1; IMSA检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度分别为0. 05%、0. 05%、0. 01%,FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度皆为0. 10%; FQ-PCR非特异性检出DP356043的NOS以及MON87701的CaMV35S与EPSPS。说明IMSA方法检测转基因豆奶外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度与特异性优于FQ-PCR。

• 单位
  广州迪澳生物科技有限公司; 达利食品集团有限公司; 甘肃省食品检验研究院