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摘要
目的：探究mTOR信号通路在索拉非尼诱导肝星状细胞(HSC)铁死亡改善肝纤维化进程中的作用及其机制。方法：用四氯化碳(CCl4)诱导C57BL/6雄性小鼠肝纤维化模型，随机分为正常组、模型组、索拉非尼低(2.5 mg/kg)，中(5 mg/kg)，高(10 mg/kg)剂量组，每组6只。除正常组外，其余4组均腹腔注射CCl4建立肝纤维化模型，第4周开始给予索拉非尼灌胃。各组小鼠于造模第8周末处死。Western blot检测肝组织中mTOR和p-mTOR表达情况。体外实验中，采用PDGF-BB诱导HSC-T6细胞活化，并加入不同浓度索拉非尼(5μM,10μM,20μM)和mTOR抑制剂及激活剂，CCK8检测HSC-T6细胞活力；Western blot检测α-SMA、COL1α1、GPX4、mTOR和p-mTOR蛋白表达情况；试剂盒检测HSC-T6中iron、GSH、MDA含量；采用双氯荧光素(2′，7′-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测ROS水平。结果：结果显示，索拉非尼可显著降低α-SMA、COL1α1、GPX4和p-mTOR的蛋白表达，并且在HSC-T6中降低GSH的水平并提高iron、MDA、ROS的含量(P<0.05)。不同浓度索拉非尼均明显抑制PDGF-BB激活的HSC-T6的细胞活力(P<0.05)。当mTOR受到抑制时，α-SMA、COL1α1和GPX4的蛋白表达以及GSH的水平会进一步降低(P<0.05),iron、MDA、ROS的含量则升高(P<0.05)。结论：索拉非尼诱导HSC铁死亡减轻肝纤维化，抑制mTOR可进一步增强索拉非尼的作用。
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