小鼠OCILrP2基因的克隆、原核表达及抗血清的制备

作者:靳迪; 饶恩于; 李景鹏; 赵勇
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2007, (01): 75-76.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.004106

摘要

目的:在原核系统中表达破骨细胞抑制凝集素家族成员之一OCILrP2基因,并制备大鼠抗OCILrP2的抗血清。方法:应用RT-PCR从小鼠脾细胞中克隆的部分OCILrP2cDNA,构建重组表达载体pET-28a-OCILrP2,并转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达His-OCILrP2融合蛋白。以表达产物免疫SD大鼠,制备大鼠抗OCILrP2的抗血清。采用Westernblot测定其效价和特异性。结果:RT-PCR法扩增出235bp的OCILrP2基因,其cDNA序列与GenBank中登录的序列一致。以构建的重组质粒pET-28a-OCILrP2转化大肠杆菌获得目的蛋白的高表达。...

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