磷酸化cAMP反应元件结合蛋白对发育期人牙乳头细胞增殖和分化的影响

作者：陈筑; 李明云

来源：贵州医药, 2017, 41(02): 131-133.

• 牙发育
• CBP
• 重组慢病毒
• 人牙乳头细胞
• 生物学作用

目的构建CBP抑制表达慢病毒载体,探讨CBP有效表达沉默后对体外培养人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)的增殖及分化影响。方法利用基因重组技术构建重组慢病毒建立牙乳头细胞沉默稳转细胞,采用CCK-8检测细胞增殖的变化,采用检测分化相关蛋白的表达评价CBP对HDPC分化能力的影响。结果测序结果提示成功构建四组人CBP基因的重组慢病毒;转染HDPC后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法筛选获得有效靶点的重组慢病毒;CCK-8检测结果表明HDPC在CBP表达下调后增殖活性受到抑制;慢病毒介导CBP沉默后影响了HDPCs相关分化蛋白ColI、OCN、OPN的表达,较对照组显著下调(P<0.05);牙乳头细胞的ALP活性在转染重组慢病毒后5,7,14d后显著降低(P<0.05);结论成功构建了高效CBP抑制表达载体,CBP沉默可抑制HDPCs的增殖和分化。

• 单位
  四川大学华西口腔医学院; 贵阳市口腔医院; 遵义医科大学