Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留定量PCR检测法的验证

作者：黄祎; 李拓; 陈若兰; 管茜茜; 阮玉; 朱秀娟; 丁玲; 马萌^*

来源：国际生物制品学杂志, 2023, 46(01).

• Vero细胞DNA残留
• 定量聚合酶链反应
• DNA探针杂交法

目的验证Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留定量PCR(quantitative PCR, qPCR)检测法。方法用试剂盒提取Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗原液的DNA, 采用qPCR检测Vero细胞DNA, 并验证方法的线性、专属性、准确性、精密度、耐用性及定量限;同时采用DNA探针杂交法检测样品。结果 qPCR检测Vero细胞DNA标准曲线在0.003 0～300.000 0 pg/μl之间线性良好;对Hep-2细胞、大肠埃希菌、酵母细胞DNA均无扩增反应;高、中、低浓度样品加标回收率在50%～150%, 准确性良好;定量检出限为0.003 0 pg/μl;精密度良好(相对标准偏差<15%);反应体系配制好后置于2～8 ℃ 30 min后进行检测, 相对标准偏差<15%, 耐用性良好。DNA探针杂交法与qPCR结果均小于0.1 pg/μl。结论 qPCR检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留具有良好的线性、专属性、准确性、精密度和耐用性, 可适用于该项检测。