迷迭香酸对H2O2诱导的视网膜色素上皮细胞衰老及HMGB1,Caveolin-1通路的影响

作者：关小荣; 李蓉^*; 姚国敏

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(02): 222-228.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.02.013

• 迷迭香酸
• 视网膜色素上皮细胞
• 衰老
• 过氧化氢
• HMGB1
• Caveolin-1

目的 探讨迷迭香酸(RA)对过氧化氢(H2O2)诱导的视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)衰老的作用及可能机制。方法 首先用不同浓度(100,200,400,800,1 600μmol/L)H2O2处理ARPE-19细胞，CCK-8法检测细胞增殖，筛选合适的H2O2浓度构建细胞衰老模型。然后将ARPE-19细胞分为对照组、H2O2组(200μmol/L)和不同浓度(20,40,80μmol/L)RA预处理+H2O2(200μmol/L)组，CCK-8法检测细胞增殖，筛选最佳RA干预浓度。最后将ARPE-19细胞分为对照组、H2O2组(200μmol/L)、H2O2(200μmol/L)+RA(80μmol/L)组，用倒置显微镜观察各组细胞形态，SA-β-gal染色法检测细胞衰老情况，Western blotting检测衰老标志蛋白P16、P21的表达以及HMGB1,Caveolin-1的表达。结果 ARPE-19细胞增殖率随H2O2刺激浓度的增加而降低(各浓度组两两比较，均P<0.01),随着RA浓度的增加而增加(各浓度组两两比较，均P<0.01)。倒置显微镜观察显示，与对照组相比，H2O2组ARPE-19细胞数量明显减少，细胞衰老率明显增加(均P<0.05);与H2O2组相比，H2O2+RA组ARPE-19细胞数量明显增多，细胞衰老率明显降低(均P<0.05)。Western blotting检测显示，H2O2组细胞P16,P21蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H2O2+RA组细胞P16,P21蛋白表达较H2O2组明显降低(P<0.05);H2O2组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H2O2+RA组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较H2O2组明显降低(均P<0.05)。结论 RA可以减轻H2O2诱导的ARPE-19细胞衰老，其机制可能与RA抑制HMGB1和Caveolin-1的激活有关。

• 单位
  西安医学院第一附属医院; 西北工业大学