突变型DNA聚合酶β真核表达载体的构建及其表达

作者：赵四敏; 陈旭东; 赵国强; 董子明

来源：重庆医学, 2012, (17): 1716-1718.

• 突变型DNA聚合酶β
• pcDNA4-C真核表达载体
• EC9706细胞 mutation DNA polymerase β
• pcDNA4-C eukaryotic expression vector
• EC9706 cell

目的构建含食管癌突变型DNA聚合酶β基因(DNA polymeraseβ,polβ)的真核表达载体pcDNA4-C-polβ,使其在polβ基因敲除的EC9706细胞中表达。方法根据食管癌突变型polβ基因序列,设计并合成一对特异性引物(引物1、引物2),通过PCR扩增获得含BamHⅠ和ApaⅠ的基因序列,将其克隆入T载体,PCR及测序鉴定无误后,将其插入真核表达载体pcD-NA4-C,从而构建了含突变型polβ基因的真核表达载体pcDNA4-C-polβ。将重组质粒以脂质体包裹的方式转染入polβ基因敲除的EC 9706细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株。结果经过PCR筛选及DNA测序鉴...

• 单位
  漯河医学高等专科学校