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摘要
目的注射用hUCMSCs属于细胞类生物制品,本研究旨在观察单次静脉给予注射用hUCMSCs后,对食蟹猴可能产生的急性毒性反应及其严重程度,并对注射用hUCMSCsP2和P4代的受试物进行比较,为其他安全性评价实验和临床用药提供基础数据。方法本试验选用检疫合格并经过适应性饲养的食蟹猴,按体重和性别均衡随机分为3组,分别为溶媒对照组(A组)、P2给药组(B组)和P4给药组(C组),A组2只动物,B、C组均为4只动物,雌雄各半。溶媒对照组给予专用细胞保存液,P2给药组和P4给药组分别以1*108个/kg.bw剂量(按等效体表面积折算法折算约相当于成人临床拟用量5×107个/人的50倍)给予P2,P4代注射用hUCMSCs,按给药顺序对动物进行静脉滴注给药。试验期间,观察动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、排泄物性状、饮食情况、中毒反应和死亡情况并按要求进行下述指标监测:体重、心电监测、血液学和凝血功能、血液生化学、尿常规、眼科检查、病理学检查。结果 (1)一般状态观察结果表明:P2给药组发现有4/4例动物在给药部位和/或采血部位出现紫色斑块,P4给药组发现有3/4例动物在给药部位和/或采血部位出现紫色斑块,后逐渐变小变淡,在给药第6天或第7天恢复;结合血液学结果发现,P2,P4给药组动物在给药后给药后2 h、第2天出现血小板数(PLT)、血小板压积(PCT%)、纤维蛋白原(Fbg)下降,凝血酶原时间(PT)、部分凝血激酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)延长的现象,因此推断为P2、P4给药组动物凝血功能受到一过性抑制,血液从给药部位以及采血部分血管穿刺口漏出,使得皮下产生紫色血斑。除发现上述现象外,未见动物死亡,未见其它异常反应。(2)体重结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次给药对食蟹猴体重未见明显影响。(3)食蟹猴肛温结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次给药对食蟹猴肛温未见明显影响。(4)血液学及凝血功能指标结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药可起受试动物白细胞数(WBC)、中性粒细胞数(NEUT)、中性粒细胞比率(NEUT%)一过性升高,白细胞升高主要由中性粒细胞数升高引起,由于溶媒对照组也具有上述变化,不排除与给药过程或溶媒相关。P2,P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药可起受试动物血小板数(PLT)、血小板压积(PCT%)、纤维蛋白原(Fbg)一过性下降,凝血酶原时间(PT)、部分凝血激酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)一过性延长,即对受试动物凝血功能产生一过性抑制作用,而在一般状态观察结果中,P2,P4给药组分别有4/4,3/4例动物于给药后第2天开始观察到给药部位、采血部位有皮下出血产生的紫斑,推断为给药后动物凝血功能受到抑制,血液从给药部位以及采血部分血管穿刺口漏出,使得皮下产生血斑。专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药可引起受试动物红细胞数(RBC)、血红蛋白量(HGB)、红细胞压积(HCT%)均比给药前轻微下降,且在长期毒性试验研究中也发现有RBC、HGB和HCT降低的类似现象,由于溶媒对照组也具有上述变化,不排除与给药过程或溶媒相关,建议对具体产生原因作进一步研究探索。(5)血液生化学结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药可引起受试动物天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)、钠(Na+)、氯(Cl-)指标一过性升高,血清磷(P)一过性降低;其中钠(Na+)、氯(Cl-)指标一过性升高可能与专用细胞保存液的成分相关,其它指标一过性升高或减低的产生原因不明,建议作进一步探索。P2,P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药可起受试动物乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)指标一过性升高,升高原因不明,其中在长期毒性试验研究中也发现给药组有总胆红素(TBIL)升高的现象,产生原因不明,建议作进一步研究探索。(6)心电图检查结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次给药对食蟹猴心电图检查指标未见明显影响。(7)尿常规结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次给药对食蟹猴尿常规指标未见明显影响。(8)眼科检查结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次给药对食蟹猴眼科检查指标未见明显影响。(9)病理学(系统解剖)检查结果表明:专用细胞保存液、P2、P4代注射用hUCMSCs单次对食蟹猴进行给药,于给药第15天进行系统解剖,系统解剖观察各组织脏器未见出现具有毒理学意义改变。结论 P2,P4代注射用hUCMSCs对食蟹猴单次给药对动物一般状态观察、血液学及凝血功能指标、生化学产生的影响基本一致。
