变形链球菌葡糖基转移酶gtfB/CAT真核表达质粒的构建及表达

作者：曲云鹏; 刘建国; 杨德琴; 麻健丰; 陈代雄; 柴巧学

来源：上海口腔医学, 2008, (03): 289-292.

• 变形链球菌
• 葡糖基转移酶
• pVAX1
• 真核表达 Streptococcus mutans
• Glucocyltransferases
• pVAX1
• Eukaryotic expression

目的:构建变形链球菌葡糖基转移酶催化区(gtfB/CAT)真核表达质粒(pVAX1-gtfB/CAT),并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法:通过基因重组技术构建pVAX1-gtfB/CAT;通过脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,然后以免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果:pVAX1-gtfB/CAT经酶切分析证实携带gtfB/CAT片段;pVAX1-gtfB/CAT转染的细胞胞质呈褐色染色,pVAX1空质粒转染的细胞胞质中无着色。结论:成功构建防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白。

• 单位
  遵义医科大学; 温州医科大学; 广东省口腔医院