弓形虫酵母表达质粒pPIC9K-GRA1的构建及鉴定

作者：谢荣华; 吴翔; 舒衡平; 蒋立平; 范久波; 谭逵; 张琼

来源：中国病原生物学杂志, 2007, (02): 115-117.

DOI：10.13350/j.cjpb.2007.02.013

• 刚地弓形虫
• GRA1
• 酵母表达质粒
• 构建
• 鉴定

目的构建弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)的酵母表达质粒,为进一步研究GRA1蛋白功能奠定基础。方法PCR扩增编码GRA1目的基因,用EcoRⅠ/NotⅠ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进行双酶切,将GRA1定向克隆到pPIC9K的EcoRⅠ/NotⅠ位点,对重组质粒进行PCR,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果特异扩增出预期的GRA1片段,大小为573 bp,扩增产物经双酶切后成功连接到pPIC9K中,经PCR,双酶切及序列测定证明重组质粒中含有GRA1读框。结论成功构建弓形虫GRA1酵母真核表达质粒。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 湖南环境生物职业技术学院