摘要
为研究镉 (Cd)胁迫对枸杞多药物和有毒化合物外排家族 (multidrug and toxic compound extrusion family, MATE)基因表达模式的影响,探讨MATE家族的基因在Cd区隔及外排中的作用,本研究以‘宁杞1号’组培苗为实验材料,采用水培处理方式,利用转录组测序技术结合生物信息学分析筛选宁夏枸杞MATE家族的差异表达基因(Log2≥2或log2≤-2);利用实时荧光定量PCR技术验证差异表达基因的表达变化模式; 筛选出MATE1和MATE2为目的基因,利用Race 技术和常规PCR技术克隆获得全长 cDNA 序列并进行生物信息学分析;构建MATE1和MATE2的酵母表达载体转化Zn/Cd敏感型酵母菌株进行Zn、Cd敏感性分析。结果显示:MATE家族的部分基因受Cd和Zn诱导上调表达倍数明显,说明MATE家族的基因可能参与了枸杞对Cd和Zn的耐受。转化Zn/Cd敏感型酵母菌株功能互补实验进一步验证了MATE1和MATE2能增强酵母对Cd和Zn的耐受性。本研究为MATE蛋白家族在枸杞耐受重金属胁迫中的功能研究提供一定的参考,为低Cd累积枸杞品种的培育提供理论基础。
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