CD97免疫表位对乳腺癌细胞株MDA-MB231生物学行为的影响

作者:田华; 陈洋; 赵建刚; 刘达人; 梁刚; 龚谓华; 陈力; 吴育连
来源:浙江大学学报(医学版), 2017, 46(04): 341-348.
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2017.08.01

摘要

目的:明确CD97免疫表位CD97EGF和CD97Stalk对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用siCatchTMsiRNA design软件设计CD97EGF小干扰RNA(siRNA)和CD97StalksiRNA并转染CD97高表达乳腺癌细胞株MDA-MB231;蛋白质印迹法筛选高敏感CD97EGFsiRNA和CD97StalksiRNA。倒置显微镜观察和计数siRNA转染后乳腺癌细胞的生长;四唑盐(MTT)法检测siRNA转染后乳腺癌细胞的增殖活性;划痕试验和Transwell试验观察siRNA转染对乳腺癌细胞迁移和侵袭力的影响;TUNEL法检测siRNA转染对乳腺癌细胞凋亡的影响;流式细胞术检测siRNA转染对乳腺癌细胞周期的影响。结果:siRNA转染后,乳腺癌细胞的生长数量和增殖活性明显低于对照组,且CD97StalksiRNA组的变化较CD97EGFsiRNA组更为显著(均P<0.05);划痕试验结果显示,siRNA转染组乳腺癌细胞的移动速率明显慢于对照组(均P<0.01),且CD97StalksiRNA对乳腺癌细胞移动速率的影响明显大于CD97EGFsiRNA(P<0.05);Transwell试验结果显示,siRNA转染组迁移过膜的细胞数量明显少于对照组,且以CD97StalksiRNA组减少最为显著(均P<0.05)。siRNA转染对乳腺癌细胞凋亡率的影响不明显,但siRNA转染组中G0/G1期细胞所占比例较对照组明显减小,而S期细胞所占的比例明显增加,且CD97StalksiRNA对细胞周期的影响较CD97EGFsiRNA更为显著(均P<0.05)。结论:CD97蛋白分子可能参与乳腺癌细胞株的生长、增殖、迁移和侵袭等生物学行为,CD97Stalk免疫表位对于乳腺癌细胞株生物学行为影响较CD97EGF免疫表位更为显著。

  • 单位
    浙江大学医学院附属第二医院

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