积雪草苷对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响及机制研究

作者：丁平; 张岱阳^*; 李贺伟; 吴燕茹; 张光恒

来源：中国中医骨伤科杂志, 2022, 30(09): 7-19.

• 积雪草苷
• 膝骨关节炎
• 骨保护素
• 核因子κB受体活化因子
• 核因子κB受体活化因子配体

目的:探讨积雪草苷(ASS)对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨损伤和骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子(RANK)/RANK配体(RANKL)信号通路的影响。方法:采用前交叉韧带切断术(ACLT)加内侧半月板切除术(MMx)诱导建立膝骨关节炎大鼠模型，建模后分为KOA组、ASS低剂量组(ASS-L组，16 mg/kg)、ASS高剂量组(ASS-H组，32 mg/kg)、ASS+si-NC组(32 mg/kg ASS+100 ng LV-si-NC载体)、ASS+si-OPG组(32 mg/kg ASS+100 ng LV-si-OPG载体),另设假手术(Sham)组，每组12只。给予相应的药物干预2周后，通过机械缩爪阈值(PWT)和热缩爪潜伏期(PWL)评估大鼠疼痛行为，酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，苏木精-伊红(HE)和番红O/固绿染色观察关节软骨组织病理学变化，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨组织基质金属蛋白酶(MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白(COL2A1)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达，蛋白质印迹(Western Blot)检测软骨组织OPG、RANK、RANKL蛋白表达。结果:与Sham组相比，KOA组大鼠的PWT和PWL值、COL2A1 mRNA、Aggrecan mRNA和OPG蛋白水平显著降低，血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、软骨组织Mankin评分和OARSI评分、MMP-13 mRNA和RANK、RANKL蛋白水平显著升高，差异有统计学意义(P<0.05);与KOA组相比，ASS-L组和ASS-H组大鼠的PWT和PWL值、COL2A1 mRNA、Aggrecan mRNA和OPG蛋白水平显著升高，血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、Mankin评分和OARSI评分、MMP-13 mRNA和RANK、RANKL蛋白水平显著降低，差异有统计学意义(P<0.05);抑制OPG可明显逆转积雪草苷对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的保护作用。结论:积雪草苷可减少促炎细胞因子的释放，抑制MMP-13表达和增加Ⅱ型胶原沉积，抑制关节软骨退变，并可能通过调节OPG/RANK/RANKL信号通路，发挥抗膝骨关节炎作用。

• 单位
  中心实验室; 华中科技大学同济医学院附属梨园医院; 恩施土家族苗族自治州中心医院