高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株JXA1反向遗传平台的构建

作者：韩晓亮; 冯松林; 孙彦阔; 王衡^*; 张桂红^*

来源：华南农业大学学报, 2020, 41(01): 34-41.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• JXA1
• 反向遗传技术
• 感染性克隆
• 病毒拯救

【目的】为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)的结构功能和致病机理的研究奠定基础。【方法】运用反向遗传技术将HP-PRRSV JXA1株的全基因组分段克隆至改造过的低拷贝载体pOKq上,并在病毒基因组两端分别添加CMV启动子和BGH终止信号肽以及在病毒全基因组第510位核苷酸突变引入Fse I酶切位点,作为遗传标记位点。采取基于DNA-launched途径进行病毒拯救,并对拯救的病毒进行生物学特性分析。【结果】构建的PRRSV JXA1毒株的全长cDNA克隆具有感染性;成功拯救了病毒,命名为rJXA1;成功引入了拯救病毒的遗传标记;拯救病毒与亲本病毒的生长曲线相似,二者达到最高滴度的时间均为感染后72 h。【结论】成功构建了JXA1株反向遗传平台,为进一步研究HP-PRRSV的致病机理、基因功能以及新型疫苗研发奠定了基础。

• 单位
  华南农业大学; 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室