基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用

作者：陈欲; 汪小福^*; 陈笑芸; 彭城; 徐俊锋; 李玥莹^*

来源：中国油料作物学报, 2021, 43(01): 70-76.

DOI：10.19802/j.issn.1007-9084.2020301

• 基因组
• DNA快速提取
• 转基因检测
• 现场检测

基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节。为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法。选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增。结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法。不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要。利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分。

• 单位
  生命科学学院; 浙江省农业科学院; 沈阳师范大学