猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测

作者：张二芹; 滕蔓; 罗俊; 赵孟孟; 许倩茹; 赵东; 邓瑞广; 张改平

来源：中国兽医杂志, 2017, 53(09): 28-30.

• 乙脑病毒
• EDⅢ蛋白
• 表达蛋白

在大肠杆菌BL21(DE3)中表达乙脑病毒(JEV)EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21(DE3)菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经NiNTA亲和层析纯化,最后通过SDS-PAGE和Western-Blot检测表达蛋白。结果成功构建原核表达载体p ET-28a-EDⅢ;EDⅢ蛋白在BL21(DE3)菌已表达,经Ni-NTA获得纯化蛋白,并经Western-Blot检测具有反应活性。

• 单位
  河南省农业科学院; 农业部; 河南农业大学