结核分枝杆菌H37Rv组氨醇脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析

作者：刘瑞卿; 金瑞良; 王虹军; 徐胜凤; 曹健; 淳于利娟; 许云敏; 王洪海

来源：复旦学报(自然科学版), 2007, (03): 384-389.

DOI：10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2007.03.022

• 结核分枝杆菌
• L-组氨醇脱氢酶
• NADH
• L-组氨醇 Mycobacterium tuberculosis
• histidinol dehydrogenase
• L-histidinol

以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增hisD基因,构建pET-28a-HDH重组质粒;转化重组质粒到E.coli BL21(DE3)并诱导表达,纯化可溶性的结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶(HDH),并对其性质进行研究,结果表明:重组结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶能以L-组氨醇和NAD+为底物催化L-组氨醇生成L-组氨酸;该酶的最适pH值为8.3,最适温度为45℃,比活力为1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+等对酶促反应有激活作用;底物NAD+和L-组氨醇的米氏常数分别为0.9765 mmol/L和2.755μmol/L;25℃时重组蛋白的二级结构中有20.5%的α-螺...

• 单位
  河南工业大学; 遗传工程国家重点实验室; 生命科学学院; 复旦大学; 生物工程学院