髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒HB2015029株感染性克隆的构建与病毒拯救

作者：陈晶; 梁雄燕; 陈雪阳; 方小伟; 高可丽; 梁桂星; 王厚坤; 李鼎伟; 方春; 杨玉莹^*; 顾玉芳^*

来源：畜牧与兽医, 2020, 52(04): 98-102.

• ALV-J
• 感染性克隆
• 病毒拯救

为了拯救具有感染性的髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)HB2015029株,本研究以含有ALV-J HB2015029株基因组片段的质粒为模板,采用高保真PCR,扩增出3段重叠并含有合适酶切位点病毒基因片段。将获得的基因组片段分别克隆至pTopo-Blunt Simple载体,经过酶切、连接成功构建了含有病毒全基因组的质粒TOPO-029-ABC。将TOPO-029-ABC质粒转染进DF-1细胞进行病毒拯救,结果表明,转染72 h后的细胞上清禽白血病病毒P27抗原呈阳性;将阳性细胞上清,接种新的DF-1细胞培养3 d,P27抗原ELISA检测、特异性PCR和间接免疫荧光试验均呈阳性,表明成功构建了ALV-J HB2015029感染性克隆,并拯救具有感染性的髓细胞瘤型ALV-J,命名为rHB2015029。

• 单位
  长江大学; 动物科学学院