摘要
目的:构建针对PIAS3的RNAi质粒载体,初步探讨抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建3个RNAi载体,用脂质体法将其转染胶质瘤细胞系CHG-5,通过半定量RT-PCR筛选干扰效率最高的重组RNAi质粒。将该RNAi质粒转染体外培养的人胶质瘤U251细胞株,用半定量RT-PCR和Western blot检测PIAS3的表达。Annexin V2 FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞增殖周期变化。结果:转染干扰质粒的细胞株PIAS3基因和蛋白表达均有减弱。流式细胞仪分析,抑制PIAS3表达能够诱导胶质瘤U251细胞拮抗凋亡(P<0.01),同时出现细胞周期改变,表现为G2期细胞比例升高,S期细胞比例降低,具有显著性差异(P<0.05)。结论:下调PIAS3基因表达使U251阻滞在G2期,拮抗细胞凋亡。
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单位重庆市肿瘤医院; 成都军区昆明总医院; 第三军医大学附属新桥医院