大鼠TNFR-Fc重组腺相关病毒载体的构建、表达及中和活性鉴定

作者：王芳; 杜芝燕; 王琳; 姜云波; 于继云; 阎瑾琦; 徐元基; 张巍

来源：免疫学杂志, 2013, (11): 992-996.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20130217

• 类风湿关节炎
• TNFR-Fc
• 重组腺相关病毒载体
• 中和活性 Rheumatoid arthritis
• TNFR-Fc
• Recombinant adeno-associated virus vector
• Neutralization activity

目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子II型受体胞外区(TNFR)融合大鼠IgG Fc片段的重组2型腺相关病毒载体(pAAV2/TNFR-Fc),并对目的蛋白TNFR-Fc的表达和生物学活性进行初步鉴定,为后续的类风湿关节炎基因治疗研究做准备。方法构建大鼠TNFR-Fc融合基因重组腺相关病毒(AAV)载体,体外转染293T细胞,收集转染上清,以ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达,并应用L929细胞测定重组表达产物的TNF-α细胞毒中和活性。结果成功构建重组表达载体pAAV2/TNFR-Fc,在转染细胞上清中检测到目的蛋白TNFR-Fc的表达,其可有效中和大鼠TNF-α的L929...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 中国人民解放军海军总医院